Correlation between clinical diagnosis and PCR analysis of serum, aqueous, and vitreous samples in patients with inflammatory eye disease

PURPOSE: To study the applicability (sensitivity, specificity) of polymerase chain reaction (PCR) tests in the detection of cytomegalovirus (CMV), herpes virus (HSV) and varicella zoster (VZV), Epstein-Barr virus (EBV), Mycobacterium sp and Toxoplasma gondii in the diagnosis of patients with or without AIDS, with presumably infectious uveitis, using serum, aqueous humor and vitreous humor samples. METHODS: Twenty individuals with uveitis of presumed infectious origin were evaluated. Sixteen of them had AIDS, four were immunocompetent individuals. We also evaluated 4 normal controls who underwent vitrectomy surgery. Clinical evaluation of the patients was performed together by three clinicians. PCR evaluations of the serum, aqueous, and vitreous humor were performed in a masked fashion by the laboratory staff. RESULTS: Twelve patients had a clinical diagnosis of CMV retinitis. Of these 6 (50 percent) had a positive PCR for CMV in the vitreous, three (25 percent) had a positive PCR for CMV in the serum, and none were positive in the aqueous. Five patients had a clinical diagnosis of acute retinal necrosis (ARN). Three (60 percent) of these had positive PCR for HSV/VZV in the vitreous. One of these patients had a positive PCR reaction for both EBV and HSV/VZV in the vitreous samples. One patient with cutaneous herpes zoster had a positive PCR reaction for HSV/VZV in the serum. Four patients had a presumed diagnosis of ocular toxoplasmosis, one patient (25 percent) had a positive PCR for Toxoplasma gondii in the serum, 3 (75 percent) had positive results in the aqueous, and 2 (50 percent) had positive results in the vitreous. One patient with presumed ocular tuberculosis had a positive PCR reaction both in the serum and in the vitreous samples. Finally, none of the four control individuals revealed any positive PCR reaction. CONCLUSION: PCR is an auxiliary diagnostic procedure that should be evaluated together with ophthalmological aspects...

OBJETIVOS: Avaliar a aplicabilidade (especificidade, sensibilidade) do teste da reação da cadeia de polimerase (PCR) na detecção de citomegalovírus (CMV), herpes vírus e varicela zoster (HSV, VZV), Epstein-Barr vírus (EBV), Mycobacterium sp e Toxoplasma gondii no diagnóstico de pacientes com ou sem AIDS, com uveíte infecciosa presumível, utilizando amostras de humor aquoso, humor vítreo e soro. MÉTODOS: Vinte pacientes com uveíte infecciosa presumível foram estudados. Dezesseis destes apresentavam AIDS e quatro eram imunocompetentes. Foram utilizados quatro pacientes como grupo controle que se submeteram a vitrectomia. A avaliação clínica foi feita conjuntamente com três oftalmologistas. O exame do PCR do soro, aquoso e vítreo foi feito sem o conhecimento da hipótese diagnóstica pela equipe do laboratório. RESULTADOS: Doze pacientes tinham o diagnóstico clínico de retinite por CMV. Deste subgrupo 6 (50 por cento) eram PCR positivo para CMV no vítreo, 3 (25 por cento) eram PCR positivos para CMV no soro e nenhum destes foi positivo no aquoso. Cinco pacientes tinham o diagnóstico clínico de necrose aguda de retina (ARN). Três (60 por cento) destes eram PCR positivos para HSV/VZV no vítreo. Um destes pacientes era PCR positivo tanto para EBV e HSV/VZV na amostra do vítreo. Um destes pacientes com herpes zoster cutâneo era PCR positivo para HSV/VZV no soro. Quatro pacientes tinham o diagnóstico de toxoplasmose ocular presumida, um paciente (25 por cento) era PCR positivo para Toxoplasma gondii no soro, 3 (75 por cento) eram positivos no aquoso e 2 (50 por cento) eram positivo no vítreo. Um paciente com tuberculose ocular presumível era PCR positivo tanto no soro quanto no vítreo. Nenhum dos pacientes do grupo controle era PCR positivo em qualquer amostra. CONCLUSÃO: O exame do PCR é procedimento diagnóstico auxiliar que deve ser utilizado conjuntamente com os aspectos clínicos.

Pesquisa de anticorpos anti Toxoplasma gondii em fluidos intra-oculares (humor vítreo e humor aquoso) de pacientes com toxoplasmose ocular, na cidade de Belém, PA / Research on antibodies anti toxoplasma gondii in intraocular fluids (Aqueous and vitreous humor) from patients with ocular toxoplasmosis, in the City of Belém, Pará State

Foi realizada pesquisa de anticorpos IgG, IgM e IgA anti-Toxoplasma gondii no soro e fluidos intra-oculares (humor aquoso e vítreo) de pacientes com toxoplasmose ocular. A partir dos resultados obtidos verificou-se que anticorpos IgG e IgA intraocular anti-Toxoplasma gondii podem vir a ser importantes marcadores no diagnóstico de toxoplasmose ocular.

Proyecto: "rol del estudio inmunológico de la muestra vítrea y de humor acuoso en el dignóstico etiológico de las panuveítis y uveítis posteriores de probable causa infecciosa" / Project: \"Role of the immnunologic study of vitreous sample and aquous humor in etiologic diagnosis of panuveitis and posterior uveitis by probable infectious cause\"

Propósito: Evaluar el rol del estudio de los fluidos intraoculares, por medio del test ELISA, en casos de uveítis difusa o posterior severa, con evolución desfavorable y amenaza visual. Métodos: Pacientes portadores de uveítis difusa o posterior, con una evolución maligna fueron seleccionados. Luego de haber firmado un consentimiento informado, se procedió a tomar muestra de humor acuosos y vítreo, así como muestras de líquido cefalorraquídeo en los casos que lo ameritaran. Cada caso fue ingresado a una planilla computarizada, donde se registraron los datos clínicos y de laboratorio. Resultados: Se estudio una cohorte formada por 9 pacientes, de sexo femenino en 2 casos y masculino en 7 casos. 2 de 9 casos eran portadores de virus de la inmunodeficiencia humana (HIV). El rango de edad fue de 7 a 61 años, con una media de 36 años. En cuatro casos, el estudio de la muestra intraocular fue decisiva en la confirmación diagnóstica. Estos casos correspondieron a sospechosos de toxoplasmosis, que demostraron altos niveles de anticuerpos en los fluidos intraoculares, especialmente en humor vítreo, probablemente debido a la cercanía con el foco coriorretinal. Estos niveles fueron significativamente más altos que los niveles sanguíneos, lo que confirma el diagnósticos de coriorretinitis toxoplásmica. Otros diagnósticos fueron: sifilis en tres casos, en los caules el estudio intraocular contribuyó a un diagnóstico más preciso. La etiología viral fue estudiada mediante cultivo en monocapa celular y fue negativa en todos los casos, al igual que el test de ELISA. Conclusión: El estudio de los fluidos intraoculares en casos de uveítis severa de etiología desconocida, demostró ser una herramienta segura y efectiva, entregando evidencia diagnóstica en 6 de 9 casos. Aunque no se pudo establecer la etiología final en tres casos, a lo menos se pudieron descartar las etiologías infecciosas más frecuentes en nuestro medio, lo que permitió un mejor enfoque del tratamiento.

Estudio inmunológico del humor acuoso normal / Immunological study of the normal aqueous humor

El ojo funciona como un compartimiento aislado del resto del organismo desde el punto de vista inmunológico, lo que explica que. ante la presencia de enfermedades inflamatorias y/o infecciosas dentro del globo ocular, muchas veces no se encuentra evidencia de estas a nivel plamático. Es necesario conocer entonces las características inmunológicas normales en los fluidos intraoculares para un mejor entendimiento y manejo de las enfermedades oculares inflamatorias y/o infecciosas. En este trabajo se logró evaluar y comprobar la idemnidad de la barrera hematoocular a través de la determinación de la relación IgG/albúmina tanto en humor acuoso como en plasma cuyo coeficiente resultó ser 0,59. Además, ante la presencia de títulos positivos en sangre para toxocariasis y toxoplasmosis, no se encontró presencia de anticuerpos contra estas en los fluidos intraoculares. Finalmente los títulos de anticuerpos para lúes fueron negativos en ambos compartimentos

Rol del estudio inmunológico de la muestra vítrea y de humor acuoso en el diagnóstico etiológico de las panuveítis y uveítis posteriores de probable causa infecciosa / Role of the immnunologic study of vitreous sample and aquous humor in etiologic diagnosis of panuveitis and posterior uveitis by probable infectious cause

En las uveítis en un porcentaje importante de casos no logra determinarse su etiología a pesar de ser sometidos a un exhaustivo estudio sistémico. Las uveítis posteriores están asociadas en forma considerable a agentes etiológicos de tipo infeccioso. No existe en nuestro medio experiencia en el estudio de fluidos intraoculares como ayuda diagnóstica en estos casos. Esta serie que consta de 13 pacientes pone de manifiesto que el conocimiento del resultado de exámenes de laboratorio de fluidos intraoculares puede ser de gran utilidad en aproximarse al diagnóstico etiológico en más del 60 por ciento de ellos, y con elllo llevar a cabo una terapia más racional. Es importante conocer las dificultades técnicas económicas, y otras que se presentan frente a estas nuevas alternativas de evaluación diagnóstica. Sin embargo, el beneficio que puede significar para los pacientes nos obliga al desarrollo de estas técnicas basadas en la utilización de micrométodos que permiten aprovechar de forma racional las muestras de fluidos intraoculares

Anticorpos IgA específicos no soro e humor aquoso de pacientes com uveíte de provável etiologia toxoplásmica / Specific IgA antibodies in serum and aqueous humor samples from patients with uveits of probable toxoplasmic etiology

Com o objetivo de se verificar as respostas imune sérica e intra-ocular relativa aos anticorpos IgA específicos na uveíte de provável etiologia toxoplasmática, assim como a associaçäo desse anticorpo com os anticorpos IgG e IgM específicos, foram comparadas amostras de soro e humor aquoso de 24 pacientes portadores de uveíte de provável etiologia toxoplasmática e de 12 pacientes com catarata, através da reaçäo imunoenzimática (ELISA). No soro de pacientes com uveíte de provável etiologia toxoplasmática, foram detectadas 3,2% de amostras positivas para o anticorpo IgG. No humor aquoso de pacientes com uveíte, foram detectados anticorpos IgA, IgG e IgM específicos em 60% e 0% das amostras respectivamente. Nos pacientes com catarata näo foram detectadas amostras de humor aquoso positivas para o anticorpo IgA específico, no grupo de pacientes com uveíte, e apenas 4,2% de positividade nas respectivas amostras de soro, sugerem que houve produçäo intra-ocular deste anticorpo, e reforça a hipótese desta uveíte ser uma infecçäo crônica, provavelmente congênita

Imunoglobulinas e anti-corpos específicos IgG-IgM para T.Gondii no soro e no humor aquoso / Immunoglobulines and specific antibodies IgG-IgM in T.Gondii in aqueous humor and serum

No humor aquoso de pacientes com uveite posterior ativa (25 pacientes) foi encontrada uma concentraçäo de imunoglobulinas significativamente maior do que em pacientes com catarata senil (10 pacientes). No humor aquoso de mais de 90% de pacientes portadores de uveite, foram detectados anticorpos anti-T. gondii, enquanto que nos pacientes com catarata isto näo ocorreu em nenhum. Näo houve diferença significativa entre os títulos de anticorpos anti-T. gondii, detectados pela reaçäo de imunofluorescencia indireta, no soro dos pacientes com uveite e dos com catarata. A reaçäo de imunofluorescência indireta para toxoplasmose, realizada com conjugado anti-IgM, foi quase sempre negativa, näo tendo colaborado para o esclarecimento diagnóstico dos casos

Coeficiente de anticorpos do humor aquoso: estudo realizado em pacientes com uveíte posterior ativa, supostamente toxoplásmica / The aqueous humor antibody coefficient: study in patients with active posterior uveitis and suspicion of ocular toxoplasmosis

O autor calculou o coeficiente de anticorpos do humor aquoso (C) em 25 pacientes portadores de uveíte posterior ativa, com a finalidade de confirmar a suspeita clínica de toxoplasmose ocular. Para isso, foram dosados imunoglobulinas A,G e M, através da imunodifusäo radial, e anticorpos anti-T. gondii, através da reaçäo de imunofluorescência indireta, no soro e no humor aquoso desses pacientes. As mesmas dosagens foram também realizadas em um grupo de 10 pacientes portadores de catarata senil, a fim de se comparar os resultados obtidos. O coeficiente de anticorpos do humor aquoso (C) foi calculado utilizando-se a seguinte fórmula: título de anticorpos anti-T. gondii no humor aquoso título de anticorpos anti-T. gondii no soro C= concentraçäo de imunoglobulinas no humor aquoso concentraçäo de imunoglobulinas no soro. Coeficientes de 2 a 7 foram considerados sugestivos e aqueles iguais ou acima de 8 indicativos de etiologia toxoplásmica. No grupo de paciente portadores de uveíte posterior, 56 por cento dos coeficientes obtidos foram superiores a 2, sendo que na metade das vezes acima de 7. Enquanto isso, no grupo de pacientes portadores de catarata senil, näo foram detectados anticorpos anti-T. gondii no humor aquoso, impedindo assim o cálculo do coeficiente. Quando se fez uma comparaçäo entre os resultados obtidos nos pacientes com menos de 30 dias de evoluçäo da uveíte e naqueles com mais de 30 dias, verificou-se existir uma diferença significativa no sentido de coeficientes mais altos nos pacientes com doença mais crônica. O estudo permitiu concluir que o exame do humor aquoso é útil no diagnóstico das uveítes posteriores. Sugeriu ou confirmou a etiologia toxoplásmica na maior parte de um grupo de pacientes com uveíte onde havia clinicamente esta suspeita. Além disso, demonstrou que é naqueles casos com maior tempo de duraçäo que se obtém os coeficientes mais significativos.